产品介绍

重组肠激酶,牛肠激酶(高纯度)

重组肠激酶

特异性高,纯度高

CAS:9014-74-8

EC:3.4.21.9

1.产品简介

肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC 3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。


2.产品优势

高纯度


高特异性


1)特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸 (DDDDK)


2
)不含其他蛋白酶,无非特异性切割

图一:SDS-PAGE检测结果,纯化的肠激酶一个单一的主带

图二:1UEK作用于50ug底物0min,10 min,20 min,30 min,40 min,50 min,60 min后的SDS-PAGE分析

图三:1U,2U,5U,10UEK作用于50ug底物4h后和1UEK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析

 

酶切条件:

按照酶活性定义,重组EK酶切条件举例:25mM Tris-HCl 8.0体系中:

融合蛋白浓度  0.1-1mg/ml (蛋白总量50-100µg

重组EK用量   1-2U

温度          25

过夜酶切,或完全酶切需12h-16h

 

常见影响肠激酶活性的因素

在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:

1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,再进行酶切。

2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切50µg蛋白)。

3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。

 

3.产品用途

用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签

 

4.产品特性

来源

重组大肠杆菌

分子量

理论MW25,850DA

活性

1U定义为在2512h~16h之内,将50ug保存于

25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。

储存

储存在-20.

稳定性

可以在常温下运输,在25,可稳定保存一周。

酶液可反复冻融数次,对酶活无影响。

 

5.产品信息

产品名称

产品编号

活性

包装

产地

重组肠激酶

KK-T008

≥10u/μl

≥50u/μl

100u 1ku 1MU

上海科开