重组肠激酶
特异性高,纯度高
CAS:9014-74-8
EC:3.4.21.9
1.产品简介
肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC 3.4.21.9)是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。
2.产品优势
高纯度
高特异性
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸 (DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,无非特异性切割
图一:SDS-PAGE检测结果,纯化的肠激酶一个单一的主带
图二:1U的EK作用于50ug底物0min,10 min,20 min,30 min,40 min,50 min,60 min后的SDS-PAGE分析
图三:1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析
酶切条件:
按照酶活性定义,重组EK酶切条件举例:25mM Tris-HCl 8.0体系中:
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml (蛋白总量50-100µg)
重组EK用量 1-2U
温度 25℃
过夜酶切,或完全酶切需12h-16h。
常见影响肠激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,再进行酶切。
2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切50µg蛋白)。
3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。
3.产品用途
用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签
4.产品特性
来源 | 重组大肠杆菌 |
分子量 | 理论MW:25,850DA |
活性 | 1U定义为在25℃,12h~16h之内,将50ug保存于 25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。 |
储存 | 储存在-20℃. |
稳定性 | 可以在常温下运输,在25℃,可稳定保存一周。 酶液可反复冻融数次,对酶活无影响。 |
5.产品信息
产品名称 | 产品编号 | 活性 | 包装 | 产地 |
重组肠激酶 | KK-T008 | ≥10u/μl ≥50u/μl | 100u 1ku 1MU | 上海科开 |